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胶体金法检测原理
将特异性的抗体以条带状固定在膜上(T线),胶体金标记试剂吸附在结合上(金垫),当待检抗原加到试纸条一端的样本垫上后,样本通过毛细作用向前移动,溶解结合垫上的胶体金标记试剂后相互反应,再移动至固定的抗原或抗体的区域时,待检物与金标试剂的结合物又与之发生特异性结合而被截留,聚集在检测带上,可通过肉眼观察到显色结果。
胶体金技术优势与不足
优势
快速:所有反应能在15分钟内完成;
操作简便:便于个人自测或医院检测;
成本低:不需要特殊的仪器设备;
稳定性好:试剂效期可达两年或更长时间;
缺点
较ELISA、化学发光等方法灵敏度低;
易出现假阳性、假阴性;
存在HOOK效应;
胶体金试剂条组成
胶体金试纸条主要由样品垫、金垫、硝酸纤维素膜(NC膜)、吸水纸4个部分组成,从上至下依次首尾互相衔接,粘贴在PVC底板上。
作用
a. 样品垫:检测样本滴加位置,对检测样本具有一定的过滤和缓冲作用,降低样本中离子强度或酸碱度对检测结果的干扰。
b. 金垫:将胶体金标记抗体通过干燥固定在玻璃纤维素膜上,是追踪抗体与抗原的反应。
c. 硝酸纤维素膜:膜上预先包被上检测线和质控线,能够与胶体金标记物发生免疫反应相结合,使胶体金在检测线发生聚集,根据检测线的显色状况进行判读结果。
d. 吸水垫:通过吸水作用使液体样品向上流动,带动金垫的金标抗体向上移动,从而与检测线的抗原发生反应。
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